液相柱后衍生和液相区别
液相柱后衍生和液相区别:
液相柱后衍生和液相色谱分析的主要区别在于衍生化的时间和方式。以下是两者的主要区别:
- 衍生化时间:在液相色谱分析中,柱前衍生是指待测物在液相色谱分离前就完成衍生化,再根据衍生物的性质进行色谱分离检测。而柱后衍生则是在色谱柱分离后进行的衍生化反应。
- 衍生化方式:柱前衍生通常是通过改善化合物的物理化学性能从而改变其选择性,提高待分析物的检测灵敏度。常用的方法是给不能被检测物质的结构中加入发色团,使其能够被检测。而柱后衍生的具体方式可能会因应用和设备的不同而有所变化。
- 对设备的要求和影响因素:柱前衍生对设备要求不高,可以人工衍生,且衍生后的副产物可以经过预处理步骤除去。但手工衍生化过程会受到人为因素的影响。相比之下,柱后衍生可能需要更专业的设备来确保衍生化反应的效率和准确性,且可能影响到检测结果的因素相对较少。
总结来说,液相柱后衍生和液相色谱分析的主要区别在于衍生化的时间和方式,以及它们对设备和人为因素的影响。具体选择哪种方法取决于分析的具体需求、样品的性质以及可用的设备和技术。
HPLC分析中,样品需要衍生化处理的目的在于将不适用于液相色谱分析的物质转变为易于分析的衍生物,通过改善化合物的物理化学性能从而改变其选择性,提高待分析物的检测灵敏度,常用的方法是给不能被检测物质的结构中加入发色团,使其能够被检测。柱前衍生是目前应用广泛的衍生技术。
柱前衍生是指待测物在液相色谱分离前就完成衍生化,再根据衍生物的性质进行色谱分离检测,若衍生过程所用的试剂若能稳定存在,且衍生反应条件成熟可靠时,其优势体现在对设备要求不高,可以人工衍生,且衍生后的副产物可以经过预处理步骤除去,相应的,手工衍生化过程会受到人为因素的影响。
柱后衍生是指待测物先经过色谱分离后,然后进入反应器中与衍生化试剂反应,后进入检测器的衍生化方法。该方法可以实现分析的自动化,反应重现性好,不影响被测物的色谱行为,但不利点在于需要配备额外的反应装置和反应设备,过长的设备管线会使从色谱柱中出来的样品在管路中造成峰扩展,导致分离度降低。
柱后衍生又称柱后反应,利用衍生反应使被测物与相应的试剂分析反应,以改变其物理或化学性质,使其被检测到。例如将发色基团或荧光基团键合到样品中去,多极放大检测灵敏度,柱后衍生系统开创了柱后衍生系统性能、价格及外形的新标准。反应器设计,造就了新一代柱后衍生系统高性能和低价格。